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Un kit de test de lactate déshydrogénase (LDH) fournit une méthode très sensible et rapide pour mesurer l'activité de la LDH. L'enzyme réagit avec une sonde spécifique pour former une couleur. Les kits de test d’activité LDH peuvent détecter des niveaux allant de un à cent mU/mL. Le test prend moins de 30 minutes. Ils conviennent également aux analyses à haut débit.
La lactate déshydrogénase (LDH) est une enzyme cytosolique soluble
La LDH est une enzyme cytosolique qui catalyse la synthèse du lactate et du pyruvate dans l'organisme. Ses concentrations dans l’organisme peuvent indiquer des dommages cellulaires et sont couramment utilisées comme biomarqueurs. L'activité de la LDH était la plus élevée dans l'EDL, suivie par le diaphragme, et la plus faible dans le SOL. Il y avait cinq isoenzymes différentes dans le sérum et chaque muscle contenait un schéma spécifique d'isoenzymes LDH. L'EDL était la plus abondante, contenant une forte proportion de LDH-5, tandis que le diaphragme avait la plus faible activité.
La LDH est libérée par les cellules lorsque l’intégrité de la membrane plasmique est compromise. En revanche, l’apoptose implique la décomposition articulée d’une cellule en corps apoptotiques liés à la membrane. Cette enzyme constitue également une mesure générale de la perméabilité de la membrane plasmique. Le test de cytotoxicité LDH-Glo(tm) fournit une méthode bioluminescente simple pour quantifier les niveaux de LDH dans des échantillons à faible nombre de cellules, tels que les sphéroïdes de microtissus 3D, les cellules primaires et les cellules souches.
L'activité de la LDH est influencée par le pH. Dans cette expérience, l'activité LDH a été mesurée dans un milieu GTSF-2 (pH 7,4-7,2) et les barres d'erreur représentent les erreurs types. Pour n = 4 cellules, les différences significatives ont été déterminées par le test de rang signé de Wilcoxon ou par un test t sur échantillon. Une fois l’équilibre du pH corrigé, l’activité LDH augmente dans les cellules et le niveau de glucose cellulaire diminue.
C'est un indicateur fiable de la viabilité cellulaire
Le nombre de cellules viables dans un échantillon est un indicateur de la viabilité cellulaire. La viabilité cellulaire joue un rôle clé dans toutes les formes de culture cellulaire. Les tests de viabilité cellulaire sont également utilisés pour corréler le comportement cellulaire avec le nombre de cellules viables. Les tests de viabilité cellulaire sont populaires dans l’industrie pharmaceutique, où les chercheurs utilisent diverses méthodes pour sélectionner des produits thérapeutiques pour diverses maladies. De nombreux traitements développés ciblent les cellules cancéreuses.
Ce kit de test est facile à utiliser, peu coûteux et offre des résultats reproductibles. Il élimine le besoin de préparation manuelle et convient aux plaques de 96 et 384 puits. Le kit de test comprend tous les réactifs nécessaires, y compris une plaque à 96 puits. Le kit comprend également un protocole contenant des instructions détaillées. La cytométrie en flux est un excellent choix pour déterminer la viabilité cellulaire en laboratoire.
Le kit de viabilité des cellules bleues Alamar est disponible auprès de Bio-Rad et Thermo Fisher Scientific. Le réactif de test de viabilité des cellules bleues G-Biosciences Alamar et le réactif de test Cell-Quant AlamarBlue sont également disponibles. Vous pouvez également vérifier la viabilité des cellules cryoconservées avec ce kit. Vous devez tenir compte du type de cellule avant de décongeler les cellules cryoconservées. Il est également important d’utiliser le réactif de test approprié à la taille des cellules.
Il est testé et validé
L’importance de valider un test diagnostique n’échappe pas aux médecins. La validation signifie la prise de décision basée sur une interprétation particulière des données d'une évaluation. Les tests diagnostiques ne sont utiles que lorsqu’ils influencent les décisions et s’ils conduisent à des changements significatifs dans la prise en charge d’un patient. Les médecins apprennent à éviter de prescrire des tests qui ne modifient pas la direction. Un excellent exemple de validation d'un test est le test PSA, qui est très fiable et fortement associé au diagnostic du cancer de la prostate.
