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Kit de test NEFA est un outil de quantification du NEFA (Oxyde Nitrique). Il est utilisé pour déterminer la concentration de NEFA dans des échantillons de sang ou de tissus. NEFA est un nutriment vital responsable de la régulation du métabolisme énergétique, de l’excitabilité cardiaque, de la conduction neuromusculaire, de la pression artérielle et de la coagulation sanguine. On le trouve principalement dans les os, les muscles, les tissus mous et les globules rouges.
Préparation
NEFA est une petite protéine de 50,2 kDa qui a la capacité de se lier à l'ADN. Il s’agit d’un complexe cytosolique d’acide gras synthase (FAS) de type I qui produit de l’acide palmitique non estérifié. En présence d'Acyl-CoA oxydase (ACS), le complexe FAS oxyde la 3-méthyl-N-éthyl-N-(b-hydroxyéthyl)-aniline en 4-aminoantipyrine, qui est le précurseur moléculaire de l'acétyl-CoA. Ce processus est un processus enzymatique crucial pour tous les organismes eucaryotes.
Bien que les NEFA n’aient pas la masse importante d’une graisse, ils constituent une source de carburant importante pour les tissus périphériques. Il est métabolisé par le foie et transporté, complexé avec l'albumine, vers les tissus périphériques. NEFA est également libéré par un domaine thioestérase (TE) du complexe FAS.
Pipetage
Les kits ELISA sont utilisés pour détecter de petits composés chimiques, protéines et peptides. Ces kits sont basés sur des protéines recombinantes exprimées dans E.coli. Les kits ne contiennent pas d'azoture, de thimérosal ni d'autres ressources naturelles.
Le kit contient des réactifs tels que du BSA, un tampon de dilution apyrogène et une solution de lavage. La solution de lavage est stable pendant deux semaines à 2-8°C. Le tampon de dilution contient du sérum physiologique à 0,9 %.
Le kit dispose d’un étalon interne NEFA. Celui-ci est enrichi de NEFA à une concentration qui correspond à la concentration attendue dans l’échantillon. L'absorbance du pigment bleu-violet à 546 nm est mesurée pour calculer la concentration de NEFA dans l'échantillon.
Colorimétrique
L’utilisation du kit WAKO NEFA a donné lieu à divers résultats, dont certains n’ont aucun sens. Néanmoins, le kit NEFA est un concurrent digne de ce nom lorsqu’il s’agit de déterminer la teneur relative en acides gras d’échantillons de tissus animaux. En tant que tel, le kit NEFA est l’un des tests de laboratoire les plus populaires. Le kit est livré avec des instructions pour tester différents types d’échantillons, notamment le sang, le sérum, la salive et divers lipides.
La partie la plus intéressante du kit est qu’il peut être utilisé pour mesurer une variété d’acides gras, y compris ceux que l’on trouve couramment dans les lipides. Le kit contient une gamme d'enzymes conçues pour détecter une variété d'acides gras, notamment les acides gras C-8 et C-16 présents chez les humains et les animaux. Néanmoins, l’utilisation du kit n’est pas recommandée pour des concentrations de FFA de haute précision sur une large plage.
Électrochimique
Les NEFA sont des acides gras importants pour la santé humaine, mais sont rarement évalués. De plus, leur détection est très coûteuse. Par conséquent, la surveillance des changements dans leurs concentrations peut contribuer à une prévention et une gestion plus précises des maladies. Dans cette étude, un kit de dosage électrochimique pour NEFA a été développé, utilisant le PDA-MWCNT comme surface du capteur. Cette électrode présentait une bonne activité électrocatalytique pour les étapes d’oxydation du NEFA et pourrait être utilisée dans des applications réelles.
L'électrode enzymatique était constituée d'un film composite multicouche de PDA-MWCNT et ACOD, ACS et polymère. L'ordre des couches a été choisi pour correspondre à l'ordre de la réaction enzymatique. Il a été déterminé que l'ACS et l'ACOD restaient biologiquement actifs dans le film.
Concentration de NEFA dans le DT2
Les concentrations de NEFA dans le sang ont été étudiées dans le contexte de l'obésité et de l'hypertension. Il a été démontré que ces composés favorisent l’élévation de la pression artérielle grâce à la stimulation a1-adrénergique et augmentent le stress oxydant. Les NEFA sont également associés au syndrome métabolique. Ces composés peuvent jouer un rôle important dans le développement de l’hypertension.
Plusieurs modèles ont été proposés pour décrire la réponse plasmatique des NEFA à une provocation intraveineuse au glucose. Le modèle de Boston a représenté avec précision la quatrième phase d’augmentation de la concentration de NEFA. Cependant, le modèle ne décrit pas la phase de latence initiale. Le modèle Fabien a utilisé une simple pente exponentielle pour décrire cette phase. De même, le modèle Thomaseth n’a pas pu décrire la phase de rebond.
Niveaux de NEFA dans les triglycérides
Plusieurs études ont étudié les effets de la chirurgie bariatrique sur la composition plasmatique des NEFA. Dans une méta-analyse publiée en 2016, les taux sériques de NEFA ont diminué 6 et 12 mois après la chirurgie. Cela peut être dû à une baisse des niveaux d’insuline. Dans une autre étude, les NEFA plasmatiques ont été mesurés dans un groupe de patients obèses avant et après un pontage gastrique de Roux-en-Y.
Les concentrations de sept NEFA ont diminué 9 mois après la chirurgie. Le linoléate (un acide gras oméga-6) a été réduit de 18:2, le stéarate de 18:0 et l'oléate de 16:0. La concentration de docosahexaénoate n’a toutefois pas été affectée. Les NEFA ont été convertis en esters méthyliques d’acides gras (FAME). Ceux-ci ont ensuite été analysés par chromatographie en phase gazeuse-spectrométrie de masse (GC-MS).