Un kit de dosage de l'adénosine désaminase de haute qualité

L'adénosine désaminase (ADA) est une enzyme naturelle impliquée dans la réponse immunitaire. La fonction de l'adénosine diphosphate (ADP) est d'activer les cellules et d'effectuer une perméabilisation membranaire et un effet cytotoxique. L'adénosine a été identifiée comme l'un des acides aminés les plus importants nécessaires à l'activité normale du cerveau humain. Il est synthétisé par le foie et distribué dans le plasma sanguin grâce aux actions du système immunitaire. L'adénosine diphosphate est un porteur du matériel génétique antiviral. Lors de Biomedical Expo, le kit de test d'activité ADA sera utilisé en combinaison avec la cytokine BioVision mentionnée précédemment.

L'adénosine diphosphate (ADP) est un transporteur du facteur de croissance des lymphocytes T. Dans BioVision Cytokine, l'adénosine désaminase (ADO) est extraite du rein disséqué et analysée à l'aide d'un test automatisé spectrophotométrique disponible dans le commerce. Le réactif a été prétraité avec de l'anti-phospho-dGlucose (PI) pour empêcher sa réaction avec l'analyte.

La composition du kit de test d'activité AIDA disponible dans le commerce comprend deux composants principaux : le réactif et l'équipement de laboratoire. Les réactifs contenus dans le kit de test d'activité Aida comprennent un cocktail d'enzymes purifiées (Sigma-FCA). L'équipement de laboratoire se compose d'un scanner de microplaques (monté derrière une lame de microscope en verre), de verrerie, d'un livret de résultats de courbe standard et d'un flacon de rinçage. Avant utilisation, les échantillons du kit de test d’activité Aida doivent être lavés avec de l’eau déchlorée. L'utilisation du réactif et du matériel de laboratoire n'est pas limitée aux seuls tests de laboratoire.

Pour examiner la capacité du kit de test d’activité Aida à mesurer l’activité totale de l’adénosine désaminase, plusieurs sessions expérimentales ont été menées. La première session consistait en quatre jours de traçage manuel. Cent cinquante microlitres d'Aida-GFP ont été dissous dans de l'eau du robinet et mélangés avec une solution saline tamponnée au phosphate. Après vingt minutes, les échantillons ont été testés sur l'écran de bilan massique HPLC.

La deuxième session comprenait deux jours supplémentaires de traçage manuel. Les échantillons ont été injectés sur la cassette de courbe pendant deux heures comme décrit ci-dessus. La troisième séance comprenait trois jours supplémentaires de traçage manuel dans la même pièce, suivis de quatre heures d'injections sous-cutanées d'adénosine désaminase (ADCA). L'échantillon de sang a été prélevé après une heure pour analyse.

Pour les tests salivaires, cinq cents microlitres de solutions étalons de désaminase et de pH rose ont été mélangés dans un punch non stérile. Les porcs étaient autorisés à boire toute une gamme de liquides, de l’eau plate aux sodas light, à leur guise. Lorsque les solutions étalons ont atteint leur point d’ébullition, un compte-gouttes contenant un volume prédéterminé de salive a été inséré et l’activité de l’adénosine désaminase a été mesurée.

Le dernier groupe de six échantillons a été analysé à l'aide d'un kit de dosage de phosphorimidazoleamine à base de salive disponible dans le commerce (Saproflavil ; Thermo Instruments). Dans cet ensemble de tests, une seule goutte de réactif phosphorimidazoleamine/ada salivaire a été mélangée à un volume d’eau du robinet et la poudre séchée a été ajoutée aux échantillons. Après trente minutes, un deuxième échantillon du même échantillon a été prélevé. Dans ce cas, l’activité de la salive a été mesurée immédiatement. Le kit avait été spécialement conçu pour mesurer l’activité de l’acide présent dans la salive humaine. Comme prévu, une activité importante a pu être détectée.

Comme prévu, les deux analyseurs ont produit des résultats similaires. La nature hautement spécifique de l'analyse par tomographie par émission de positons salivaires (SPECT), ainsi que la méthodologie hautement sensible (détection élevée de liquide intra-oral) ont permis d'obtenir des mesures toujours très précises et significatives. Le personnel du laboratoire utilisé pour les procédures était tous experts dans le domaine. Il n’y avait aucune preuve de contamination ou d’erreur expérimentale. Les sujets testés ont donné leur consentement éclairé et la procédure a suivi les recommandations établies par l'American Association of Clinical Endocrinologists. Dans l'ensemble, les résultats obtenus à partir du kit de test Adénosine Désaminase ont montré une bonne reproductibilité, qui a été confirmée par des études distinctes menées par des laboratoires cliniques indépendants.